在整個實驗期間,使用2個月大的雄鼠。在小鼠適應后,隨機分配小鼠到治療組或對照組。治療組每天接受27天的益生菌混合物(LS + LG),通過使用小鼠灌胃套管進行胃內灌注。對照組則進行胃內灌注0.9% NaCl溶液。經過10天后,將小鼠單獨放入觀測籠中,觀測籠詳細情況見下文。在適應觀測籠1周后,小鼠接受CMS模型,該模型包括間歇性的聲音和光照。自動監測攝食行為,手動測量飲水量,食物、水和2%蔗糖溶液可隨意獲取。小鼠在不同的時間接受幾項行為測試,用于分析運動、焦慮和抑郁樣行為,包括曠場、高架十字迷宮、O型迷宮、懸尾試驗、強迫游泳實驗等測試,并使用EV等軟件來自動測量移動距離和花費時間等參數(實驗設計如圖1)。
觀測籠及攝食行為分析
觀測籠通過諾達思的鼠類家居行為活動觀測箱(PhenoTyper)與食物和飲料攝入監測器以及自動門控制器相結合,用于監測食物攝入量、水和蔗糖攝入量、運動活動和類似焦慮行為。PhenoTyper是一個可配置的儀器類觀測系統,其頂部單元包含了一個紅外敏感攝像頭,3組紅外LED燈,以及一個由動物運動軌跡跟蹤系統(EthoVision XT)控制的音頻刺激系統,本實驗中PhenoTyper還增加了一個灰色的躲避屋。